كيفية القيام التخفيفات التسلسلية

المحتوى

• مراحل
• الطريقة الأولى: إجراء تخفيف بسيط
• الطريقة 2 حساب عامل التخفيف النهائي والتركيز

في الكيمياء ، يتكون التخفيف من تقليل تركيز محلول معين. التخفيف التسلسلي هو مجرد تخفيف متكرر للحل الأصلي لتضخيم عامل التخفيف بسرعة. غالبًا ما يتم إجراء هذا النوع من التخفيف أثناء التجارب التي تتطلب حلولًا مخففة للغاية ودقة عالية ، مثل تلك التي تنطوي على منحنيات التركيز على مقياس السجل أو تلك التي تسمح بحساب كثافة البكتيريا في بعض الوسائط. وغالبًا ما يتم إجراؤها في الكيمياء الحيوية أو الأحياء الدقيقة أو الصيدلة أو الكيمياء.

مراحل

الطريقة الأولى: إجراء تخفيف بسيط

1. 
   

   
   حدد السائل المخفف الأيمن (أو المخفف). يعتبر اختيار المادة المخففة مهمًا جدًا ويعتمد على الحل الذي تريد تخفيفه. غالبًا ما يكون الماء المخفف عبارة عن ماء مقطر ، لكنه غير منتظم. وبالتالي ، باستخدام محلول يحتوي على بكتيريا أو خلايا ، يتم استخدام وسيط استزراع بدلاً من ذلك. للتخفيف التسلسلي ، يتم استخدام نفس المادة المخففة في جميع الأنابيب.
   • إذا لم تكن متأكدًا من أي مادة مخففة تستخدم ، احصل على المساعدة من شخص مختص أو ابحث على الإنترنت عما يجب على الناس فعله لتجربة مماثلة.

2. 
   

   
   إعداد عدة أنابيب اختبار تحتوي على 9 مل من السائل التخفيف. سيتم استخدام أنابيب الاختبار هذه لإجراء التخفيفات المتتالية. المبدأ بسيط ، ستأخذ عينة من محلول البداية وتحولها إلى الأنبوب التالي ، ثم تأخذ عينة من هذا الأنبوب لوضعها في التالي ، إلخ.
   • قبل البدء في التخفيفات ، يُنصح بتحديد أنابيب الاختبار مسبقًا لتجنب الالتباس لاحقًا.
   • في كل أنبوب ، سيكون لديك تركيز أقل بعشر تركيز من الأنبوب السابق. سيحتوي الأنبوب الأول على محلول مخفف في العاشرة والثاني والمائة والثالث والألف وما إلى ذلك. تحديد مقدما عدد التخفيفات لتجنب صنع أنابيب أكثر مما هو ضروري والتخفيف المخفف دون داع.

3. 
   

   
   
   
   تحضير أنبوب اختبار مع الحل الأم. ضع ما لا يقل عن 2 مل. الحد الأدنى من محلول المخزون للتخفيف التسلسلي هو واحد ملليلتر. السماح 2 مل لتخفيف الثانية المحتملة. هذا الأنبوب من الحل الأم ، يمكنك وضع علامة عليه "SM".
   • قبل البدء في التخفيف التسلسلي ، قم بخلط محلول البدء جيدًا.

4. 
   

   
   جعل التخفيف الأول. ماصة 1 مل من محلول المخزون في أنبوب الاختبار المسمى "SM" ونقل هذا المبلغ إلى أنبوب الاختبار المسمى. 1/10 الذي يحتوي بالفعل على 9 مل من السائل التخفيف. مزيج للحصول على حل متجانس. في هذا الأنبوب ، يوجد الآن 10 مل من المحلول: 1 مل من محلول المخزون و 9 مل من السائل المخفف. هذا الحل الجديد أقل تركيزًا بعشر مرات من الحل السابق.

5. 
   

   
   أداء التخفيف الثاني. في التخفيف التسلسلي الثاني ، سوف ترسم 1 مل من محلول الأنبوب المسمى 1/10 وسوف تصب في الأنبوب 1/100 الذي يحتوي بالفعل على 9 مل من السائل التخفيف. الأنبوب 1/10 ستكون مختلطة بشكل جيد قبل أخذ العينات. بمجرد الانتهاء من عملية النقل ، اخلطي الأنبوب جيدًا 1/100. الحل من أنبوب ملحوظ 1/10 10 مرات أكثر تركيزًا من الأنبوب المسمى 1/100.

6. 
   

   
   
   
   كرر هذا التلاعب إذا لزم الأمر. يمكن تكرار هذا الإجراء عدة مرات حسب الرغبة حتى يتحقق التخفيف المطلوب. للتجربة التي تنطوي على منحنيات التركيز ، يمكنك بالتالي الحصول على سلسلة من الحلول مع التخفيفات للوحدة ، العاشرة (1/10) ، المائة (1/100) أو الألف (1/1000).

الطريقة 2 حساب عامل التخفيف النهائي والتركيز

1. 
   

   
   احسب نسبة التخفيف النهائي بعد التخفيف التسلسلي. النسبة الإجمالية للتخفيف تحصل عليها بضرب عامل التخفيف من تلقاء نفسه عدة مرات كما توجد التخفيفات. رياضيا ، الصيغة هي كما يلي: D_تي = د₁ س د₂ س د₃ س ... س د_نمع D_تي تمثل عامل التخفيف الكلي و D_ننسبة التخفيف.
   • لذلك ، لنفترض أنك تقوم بإجراء تخفيف 1/10 للسائل 4 مرات متتالية. في الصيغة ، استبدل عامل التخفيف بقيمته: D_تي = 10 × 10 × 10 × 10 = 10،000
   • عامل التخفيف النهائي للأنبوب الرابع في التخفيف التسلسلي لديك هو 1/10000. تركيز محلول الأنبوب الأخير أقل الآن بمقدار 10 آلاف مرة من تركيز المحلول الأصلي.

2. 
   

   
   تحديد تركيز محلول بعد التخفيف. للعثور على التركيز النهائي للحل بعد التخفيف التسلسلي ، تحتاج إلى معرفة تركيز البداية. الصيغة هي: C_نهائي = ج_أول/ Aمع C_نهائي يمثل التركيز الطرفي للمحلول المخفف ، C_أول، تركيز محلول المخزون و D، نسبة التخفيف تحدد مقدما.
   • لذلك ، إذا قمت بتخفيف محلول خلية بتركيز 1،000،000 خلية لكل مل وتم ضبط نسبة التخفيف على 1000 ، فما هو التركيز النهائي لعينتك المخففة؟
   • استخدم الصيغة:
     • C_نهائي = ج_أول/ A
     • C_نهائي = 1 000 000/1 000
     • C_نهائي = 1000 خلية / مل

3. 
   

   
   انتبه إلى الوحدات المستخدمة. عند إجراء العمليات الحسابية الخاصة بك ، تحقق دائمًا من أنك تستخدم نفس الوحدات. وبالتالي ، إذا بدأت من تركيز خلايا لكل مل ، فإن النتيجة النهائية ستكون أيضًا في خلايا لكل مل. إذا كان تركيزك الأساسي في أجزاء لكل مليون (جزء في المليون) ، فسيكون تركيزك النهائي في أجزاء لكل مليون.